Os bioengenheiros e os cientistas da vida incorporam a tecnologia de hibridoma para produzir um grande número de anticorpos idênticos e desenvolver novas terapias e diagnósticos de anticorpos. Estudos pré-clínicos e clínicos recentes sobre a tecnologia destacam a importância dos isotipos de anticorpos para a eficácia terapêutica. Em um novo estudo, uma equipe de pesquisa na Holanda desenvolveu uma versátil plataforma de repetições curtas regularmente intercaladas em cluster (CRISPR) e uma plataforma de reparo direcionado à homologia (HDR) para projetar rapidamente domínios de imunoglobina e formar hibridomas recombinantes que secretam anticorpos de um formato preferido, espécies ou isótipo. No estudo, Johan M. S. van der Schoot e colegas dos departamentos interdisciplinares de imunologia, proteômica, imunohematologia, imunologia translacional e oncologia médica, usaram a plataforma para formar hibridomas recombinantes, quimeras e mutantes. Os produtos de anticorpos estáveis ??mantiveram sua especificidade de antígeno. A equipe de pesquisa acredita que a plataforma versátil facilitará a engenharia de anticorpos em larga escala para a comunidade científica, para capacitar a pesquisa pré-clínica de anticorpos. O trabalho está agora publicado no Science Advances.
Os anticorpos monoclonais (mAb) revolucionaram o campo da medicina com aplicações no tratamento de doenças que antes eram consideradas incuráveis. A tecnologia de hibridoma é amplamente utilizada desde 1975 para descoberta, triagem e produção de mAb, como linhas celulares imortais que podem produzir grandes quantidades de mAbs para novas terapias baseadas em anticorpos. Os cientistas haviam gerado, validado e facilitado um grande número de hibridomas na última década para pesquisas pré-clínicas, onde o formato e os isotipos de mAb eram importantes para entender seu desempenho em modelos pré-clínicos. Os mAbs geneticamente modificados são normalmente produzidos com tecnologia recombinante, onde os domínios variáveis ??devem ser sequenciados, clonados em plasmídeos e expressos em sistemas transitórios. Esses processos são demorados, desafiadores e caros, levando a trabalhos terceirizados em empresas de pesquisa contratadas, o que dificulta o processo de desenvolvimento acadêmico de anticorpos em estágio inicial e pesquisa pré-clínica.
Em seu mecanismo de ação, os domínios de anticorpos constantes que formam o domínio cristalizável (Fc) do fragmento são centrais para a eficácia terapêutica dos mAbs, uma vez que se envolvem com receptores Fc específicos (FcRs). O trabalho de pesquisa precedente havia destacado o papel central da Fc na terapêutica baseada em anticorpos para enfatizar esse papel. Desde o seu surgimento, a tecnologia de edição de genoma direcionada ao CRISPR e à proteína Cas-9 (CRISPR-Cas9) abriu inúmeras oportunidades interessantes para terapia gênica, imunoterapia e bioengenharia. Os pesquisadores usaram o CRISPR-Cas9 para modular a expressão do mAb em hibridomas, gerar uma plataforma de hibridomas e projetar hibridomas para introduzir a modificação de anticorpos. No entanto, uma plataforma para substituição Fc versátil e eficaz de espécies estrangeiras dentro de hibridomas com domínios constantes permanece por ser geneticamente modificada.
Publicado em 14/09/2019
Artigo original: https://phys.org/news/2019-09-genome-crisprhdr-diversify-functions-hybridoma-produced.html
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